【Morris水迷宮】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
雖然老鼠是天生的游泳健將,但是它們卻厭惡處于水中的狀態(tài),同時(shí)游泳對(duì)于老鼠來(lái)說(shuō)是十分消耗體力的活動(dòng),他們會(huì)本能的尋找水中的休息場(chǎng)所。尋找休息場(chǎng)所的行為涉及到一個(gè)復(fù)雜的記憶過(guò)程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺(jué)信息,再對(duì)這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隱藏在水中的站臺(tái),最終從水中逃脫。
Morris水迷宮(Morris water maze, MWM)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置覺(jué)和方向覺(jué)(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開(kāi)發(fā)/篩選/評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)、行為生物學(xué)及時(shí)辰生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)(CAI)。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
①將動(dòng)物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,放入位置隨機(jī)取東、西、南、北四個(gè)起始位置之一。記錄動(dòng)物找到水下平臺(tái)的時(shí)間(s)。在前幾次訓(xùn)練中,如果這個(gè)時(shí)間超過(guò)60s,則引導(dǎo)動(dòng)物到平臺(tái)。讓動(dòng)物在平臺(tái)上停留10s.
②將動(dòng)物移開(kāi)、擦干。必要時(shí)將動(dòng)物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,放回籠內(nèi)。每只動(dòng)物每天訓(xùn)練4次,兩次訓(xùn)練之間間隔15~20min,連續(xù)訓(xùn)練5天。
③最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,將平臺(tái)撤除,開(kāi)始60s的探查訓(xùn)練。將動(dòng)物由原先平臺(tái)象限的對(duì)側(cè)放入水中。記錄動(dòng)物在目標(biāo)象限(原先放置平臺(tái)的象限)所花的時(shí)間和進(jìn)入該象限的次數(shù),以此作為空間記憶的檢測(cè)指標(biāo).
④測(cè)定動(dòng)物的工作記憶(working memory)。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開(kāi)始維持4天的對(duì)位訓(xùn)練。將平臺(tái)放在原先平臺(tái)所在象限的對(duì)側(cè)象限,方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺(tái)的時(shí)間和游泳距離以及游泳速度。
(4) 案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①對(duì)比食物驅(qū)動(dòng)的模型(如放射臂迷宮),水迷宮實(shí)驗(yàn)的最大優(yōu)點(diǎn)在于,動(dòng)物具有更大的、逃離水環(huán)境的動(dòng)機(jī)。而且不必禁食,特別適合老年動(dòng)物的測(cè)試。加上它對(duì)衰老引起的記憶減弱尤其敏感,因此,水迷宮最常用于老年動(dòng)物記憶的研究。
②每天在固定時(shí)間測(cè)試。操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。
③當(dāng)與其他同類(lèi)實(shí)驗(yàn)相比較時(shí),要注意到動(dòng)物的性別、品系、泳池的尺寸和水溫等多種因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。此外,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時(shí),要考慮到動(dòng)物的體重、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對(duì)游泳速度可能造成影響。
④用老年動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)確認(rèn)動(dòng)物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作。其方法如下:將平臺(tái)露出水面以使動(dòng)物能夠看見(jiàn)平臺(tái)。動(dòng)物放入泳池后如毫無(wú)困難地直接游向平臺(tái),說(shuō)明動(dòng)物的游泳能力和視力均正常,可以開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。
⑤游泳對(duì)動(dòng)物是一個(gè)較大的應(yīng)激刺激,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化。這些變化可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。對(duì)老年動(dòng)物,嚴(yán)重時(shí)可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致昏厥甚至猝死。因此,必要時(shí)可將動(dòng)物多次放入泳池或適當(dāng)延長(zhǎng)其游泳時(shí)間以增加動(dòng)物對(duì)游泳的適應(yīng)能力。
⑥當(dāng)用實(shí)驗(yàn)染料攪渾泳池的水時(shí),要定期換水以免水腐敗變質(zhì)。
【動(dòng)物跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
動(dòng)物跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)主要利用動(dòng)物跑臺(tái)讓鼠類(lèi)小動(dòng)物作跑步運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,可取代傳統(tǒng)的游泳訓(xùn)練,使訓(xùn)練強(qiáng)度指標(biāo)更加準(zhǔn)確。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
動(dòng)物跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)是體能、耐力、運(yùn)動(dòng)損傷、營(yíng)養(yǎng)、藥物、生理和病理等實(shí)驗(yàn)的必要的手段之一。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的過(guò)程中,密切觀察大鼠的運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)和運(yùn)動(dòng)能力的變化,避免運(yùn)動(dòng)性過(guò)度疲勞的發(fā)生。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,每天給大鼠加料、換水、打掃清潔,每周稱(chēng)體重和稱(chēng)量大鼠的飲食量一次。
1)打開(kāi)軟件,點(diǎn)擊“開(kāi)始設(shè)置”按鈕(此時(shí)開(kāi)始設(shè)置按鈕變?yōu)榫G色),此時(shí)將導(dǎo)入上次設(shè)置的參數(shù)。
①總時(shí)間:設(shè)定實(shí)驗(yàn)總時(shí)間,可以通過(guò)中間的輸入框直接用鍵盤(pán)輸入,也可以通過(guò)最左邊的按鈕調(diào)節(jié),步進(jìn)值為1分鐘。
②跑步時(shí)間:設(shè)定動(dòng)物跑動(dòng)的時(shí)間,設(shè)置方法與總時(shí)間的設(shè)置一樣。
③休息時(shí)間:設(shè)定動(dòng)物休息的時(shí)間,設(shè)置方法與總時(shí)間的設(shè)置一樣。
④刺激設(shè)定:設(shè)定電刺激的電流大小,通過(guò)左邊按鈕設(shè)置,步進(jìn)值為0.05mA。
⑤選擇COM端口:選擇串口線(xiàn)與計(jì)算機(jī)的通信端口,默認(rèn)為COM1。
⑥速度設(shè)定:調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速,步進(jìn)值為1m/min。支持實(shí)時(shí)調(diào)節(jié)。
⑦聲音刺激:控制聲音刺激的有無(wú),實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之后實(shí)時(shí)控制。
⑧光刺激:控制光刺激的有無(wú),實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之后實(shí)時(shí)控制。
⑨電刺激:控制電刺激的有無(wú),實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之后實(shí)時(shí)控制。
2)參數(shù)設(shè)定完成之后,點(diǎn)擊“開(kāi)始實(shí)驗(yàn)”按鈕。此時(shí)電機(jī)啟動(dòng),數(shù)據(jù)顯示在右邊的藍(lán)色區(qū)域內(nèi),同時(shí)以表格形式顯示在右下角區(qū)域。
3)實(shí)驗(yàn)結(jié)束按鈕可以隨時(shí)停止實(shí)驗(yàn),試驗(yàn)時(shí)間到也會(huì)停止實(shí)驗(yàn)。
(4) 案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①購(gòu)進(jìn)的大小鼠首先在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行一周左右的生活環(huán)境的適應(yīng)性飼養(yǎng)。
②第二周進(jìn)行跑臺(tái)適應(yīng)性運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,做正式實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)剔除個(gè)別始終拒跑的鼠。
③正式實(shí)驗(yàn)時(shí),科研人員按研究項(xiàng)目的需要,設(shè)定運(yùn)動(dòng)速度、跑臺(tái)坡度角等進(jìn)行動(dòng)物運(yùn)動(dòng)跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)。
【懸尾實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)固定動(dòng)物尾部使其頭向下懸掛,動(dòng)物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無(wú)法逃脫,從而提供了一個(gè)無(wú)可回避的壓迫環(huán)境,一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)后, 記錄處于該環(huán)境的動(dòng)物產(chǎn)生絕望的不動(dòng)狀態(tài)過(guò)程中的一系列參數(shù),動(dòng)物的表現(xiàn)出的這種典型的“不動(dòng)狀態(tài)”,反映了一種被稱(chēng)之為“行為絕望狀態(tài)”,
懸尾實(shí)驗(yàn)(The Tail Suspension Test,TST)是一項(xiàng)小鼠行為測(cè)試,可用于篩選潛在的抗抑郁物,以及評(píng)估預(yù)期會(huì)影響抑郁相關(guān)行為的實(shí)驗(yàn)方法。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
這種行為絕望模型與抑郁癥類(lèi)似,而且對(duì)絕大多數(shù)抗抑郁物敏感,而且其藥效與臨床藥效顯著相關(guān),所以被廣泛用于抗抑郁物的初選。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
有專(zhuān)門(mén)的懸尾測(cè)試儀,主要用于抗抑郁、鎮(zhèn)靜以及止痛類(lèi)藥物的研究。該儀器適用于大鼠、小鼠或其他實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物,通過(guò)固定動(dòng)物尾部使其頭向下懸掛,記錄處于該環(huán)境的動(dòng)物產(chǎn)生絕望的不動(dòng)狀態(tài)過(guò)程中的一系列參數(shù)。
方法 :將小鼠尾部后1/3處用膠帶固定,懸掛于支架上,頭部距離臺(tái)面15cm,進(jìn)行攝像,攝像背景與小鼠毛色呈明顯反差,白色小鼠采用黑色背景。計(jì)時(shí)6min后停止,利用小動(dòng)物行為學(xué)分析軟件:用Smart 2.5軟件對(duì)小鼠后四分鐘(3-6min)的不動(dòng)時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
1)TST 懸尾實(shí)驗(yàn)不建議用較重的大鼠,因?yàn)榇笫笾荒芡ㄟ^(guò)它們的尾巴來(lái)支持它們的體重,這對(duì)大鼠來(lái)說(shuō)是痛苦的。同樣的道理,應(yīng)該注意避免使用異常重的小鼠(例如用于模擬肥胖的小鼠),在這種情況下,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)該尋找替代性的測(cè)試,例如強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。
2)動(dòng)物從居住環(huán)境帶入實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)適應(yīng)一段時(shí)間,通常至少一個(gè)小時(shí)。
3)實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持安靜,突然大的噪音會(huì)使小鼠驚慌失措。
4)使用軟件分析時(shí),選擇合適對(duì)比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的帶背光板的專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)設(shè)備;對(duì)老鼠的顏色沒(méi)有要求,更可拍攝出高質(zhì)量,高對(duì)比度的實(shí)驗(yàn)錄像。
5)每只小鼠的實(shí)驗(yàn)空間多大?參考空間在 55cm高*15cm寬*11.5 cm 左右,多通量實(shí)驗(yàn)時(shí),為防止動(dòng)物彼此觀察或互相影響,中間用隔板隔開(kāi);動(dòng)物懸掛在隔間中間,寬度和深度足夠大,不能與墻壁接觸。
6)懸掛后動(dòng)物鼻尖與設(shè)備地板之前的距離多少?參考距離在 20~25 cm 左右。
7)底部建議放置一個(gè)可拆卸的拖盤(pán),收集糞便或尿液。
8)懸掛用的膠帶應(yīng)牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上,并且足夠堅(jiān)固以承受正在測(cè)試的小鼠的重量。但是,膠帶不應(yīng)該過(guò)于粘滯,因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)結(jié)束會(huì)從尾部移除。膠帶尺寸應(yīng)統(tǒng)一,長(zhǎng)度 17 厘米,從一端 2 厘米做標(biāo)記。這個(gè) 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部,而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠;膠帶應(yīng)貼在尾部的尾端,尾部留 2-3 毫米的距離。
9)尾巴攀爬阻止器,小鼠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程,會(huì)出現(xiàn)追求和攀爬它們自己的尾巴的現(xiàn)象,這是個(gè)普遍的問(wèn)題。解決方法很簡(jiǎn)單,而且非常有效:將一段塑料管切成 4 cm 長(zhǎng)中空?qǐng)A柱體(內(nèi)徑 1.3 cm 左右,1.5 g)放置在小鼠尾巴周?chē)湍芊乐惯@種尾巴爬行行為。注意的是,在沒(méi)有使用阻止器之前,已經(jīng)成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應(yīng)將這類(lèi)小鼠排除。
10)分析時(shí)僅有前肢但沒(méi)有后肢介入的小動(dòng)作可判斷為不動(dòng);因慣性產(chǎn)生的擺動(dòng)可判斷為不動(dòng);上海欣軟信息科技有限公司開(kāi)發(fā)的Super系列行為學(xué)系統(tǒng)之SuperTst懸尾實(shí)驗(yàn)分析軟件可識(shí)別動(dòng)物頭部、尾巴、前肢、后肢、重心等部位,準(zhǔn)確區(qū)分并識(shí)別出運(yùn)動(dòng)和不動(dòng)行為,
11)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后(通常是 6 分鐘),將動(dòng)物放回鼠籠,應(yīng)輕輕將膠帶從尾巴上拉下來(lái),不要從尾巴上撕扯膠帶,避免給動(dòng)物帶來(lái)痛苦;
12)清潔用品,每次實(shí)驗(yàn)完成,收集糞便和尿液,徹底擦拭懸掛盒。
【八臂迷宮實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
八臂迷宮(8-Arm Maze)用來(lái)檢測(cè)藥物或大腦受損狀態(tài)下學(xué)習(xí)和記憶方面的表現(xiàn),它由八個(gè)完全相同的臂組成,這些臂從一個(gè)中央平臺(tái)放射出來(lái),所以又被稱(chēng)為放射迷宮(Radial Maze)。
每個(gè)臂盡頭有食物提供裝置,根據(jù)分析動(dòng)物取食的策略即進(jìn)入每臂的次數(shù)、時(shí)間、正確次數(shù)、錯(cuò)誤次數(shù)、路線(xiàn)等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的空間記憶能力。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
八臂迷宮操作簡(jiǎn)便、可行,而且能區(qū)分短期的工作記憶和長(zhǎng)期的參考記憶,現(xiàn)已被廣泛用于學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知實(shí)驗(yàn)功能評(píng)價(jià)。ZH-3000八臂迷宮主要的分析主要指標(biāo)為 名稱(chēng)、分組、工作記憶錯(cuò)潛伏期、參考記憶錯(cuò)誤潛伏期、總正確次數(shù)、總進(jìn)臂次數(shù)、工作記憶錯(cuò)誤次數(shù)、參考記憶錯(cuò)誤次數(shù)、正確潛伏期、正確率、工作記憶錯(cuò)誤率、參考記憶錯(cuò)誤率、首錯(cuò)前正確次數(shù)、測(cè)試時(shí)間、軌跡圖等。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
1)動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后,稱(chēng)重,禁食24小時(shí)。此后每天訓(xùn)練結(jié)束后限制性地給予正常食料(據(jù)體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。
2)第二天,迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時(shí)將4只動(dòng)物置于迷宮中央(通往各臂的門(mén)打開(kāi)),讓其自由攝食、探究10min。
3)第三天,重復(fù)第二天的訓(xùn)練。這一過(guò)程讓動(dòng)物在沒(méi)有很強(qiáng)的應(yīng)激條件下熟悉迷宮環(huán)境。
4)第四天起,動(dòng)物單個(gè)進(jìn)行訓(xùn)練:在每個(gè)臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動(dòng)物自由攝食。食粒吃完或10min后將動(dòng)物取出。
5)第五天,將食物放在食盒內(nèi),重復(fù)前一天的訓(xùn)練,一天2次。
6)第六天以后,隨機(jī)選4個(gè)臂,每個(gè)臂放一顆食粒;各臂門(mén)關(guān)閉,將動(dòng)物放在迷宮中央;30s后,臂門(mén)打開(kāi),讓動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒,直到動(dòng)物吃完所有4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實(shí)驗(yàn)終止。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
1)小鼠放射迷宮設(shè)備和實(shí)驗(yàn)程序與大鼠類(lèi)似,但迷宮規(guī)格應(yīng)比大鼠迷宮小1/4~1/2,以免增加小鼠行為操作難度。
2)本實(shí)驗(yàn)也可只用來(lái)測(cè)定工作記憶。方法中唯一不同的是,在所有放射臂均放置食粒,而不是只選4個(gè)臂放置食粒。
3)慢性應(yīng)激對(duì)動(dòng)物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,且存在性別差異。經(jīng)過(guò)慢性應(yīng)激以后,雄性大鼠記憶力減弱,表現(xiàn)為記憶錯(cuò)誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強(qiáng),表現(xiàn)為錯(cuò)誤頻率減少。
4)即使在限制進(jìn)食條件下,也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g,以免動(dòng)物因營(yíng)養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動(dòng)物。
5)迷宮周?chē)娜魏我患锲肪杀粍?dòng)物用來(lái)作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動(dòng)這些標(biāo)志可能使動(dòng)物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。
6)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌詫m放射臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動(dòng)物記住探究過(guò)的臂也越小,動(dòng)物的行為操作就越簡(jiǎn)單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對(duì)動(dòng)物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過(guò)去的迷宮學(xué)習(xí)對(duì)目前所測(cè)記憶的影響)。所以,通常使用8臂放射迷宮,既可減少不必要的、過(guò)多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測(cè)試所花的時(shí)間。?
7)所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動(dòng)物最喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對(duì)于測(cè)試某些影響動(dòng)物對(duì)固體食物吞咽的藥物(抗膽堿能藥)尤為實(shí)用。?
8)影響動(dòng)物迷宮操作主要有兩大因素:對(duì)迷宮或觀察者的恐懼與動(dòng)物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使??謶忠蛩剡^(guò)強(qiáng)會(huì)阻止動(dòng)物的迷宮操作,使動(dòng)物始終停留在迷宮的某一個(gè)地方而不去探究。缺乏對(duì)食物的渴求也會(huì)產(chǎn)生類(lèi)似結(jié)果,增加對(duì)動(dòng)物的撫摸,必要時(shí)加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動(dòng)物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,可減少食物量,但必須同時(shí)監(jiān)測(cè)體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對(duì)多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。?
9)與水迷宮不同,放射臂迷宮適合反復(fù)測(cè)試或長(zhǎng)期記憶的測(cè)試。一般認(rèn)為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長(zhǎng)期記憶。
【大小鼠明暗箱(黑白箱)實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
利用小鼠或大鼠具有趨暗避明的習(xí)性設(shè)計(jì)的裝置,一半是暗室,一半是明室,中間有一小洞相連。暗室底部鋪有通電的銅柵。動(dòng)物進(jìn)入暗室即受到電擊。本實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單易行,反應(yīng)箱越多,同時(shí)訓(xùn)練的動(dòng)物越多。以潛伏期為指標(biāo),動(dòng)物的差異性比較小。對(duì)記憶過(guò)程特別是記憶再現(xiàn)有較高的敏感度。
在明暗箱中,小鼠或大鼠喜歡在暗箱活動(dòng),但動(dòng)物的探究習(xí)性促使其試圖去探究明箱。然而,明箱的亮光刺激又抑制動(dòng)物在明箱的探究活動(dòng)。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開(kāi)發(fā)/篩選/評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,是醫(yī)學(xué)院校開(kāi)展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的優(yōu)選經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
明暗箱(45cm*27cm*27cm)中暗箱占三分之一,頂部加蓋;明箱占三分之二,亮光照明,兩箱之間的隔墻有一個(gè)7.5cm*7.5cm的門(mén)洞供動(dòng)物穿過(guò)。明暗箱置于Animex活動(dòng)計(jì)數(shù)儀上,可同時(shí)記錄動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)活性。動(dòng)物給藥后一定時(shí)間置于明箱中央,記錄10min內(nèi)穿箱次數(shù)及分布在明箱和暗箱的滯留時(shí)間。
Shimada等人1995年對(duì)明暗箱的裝置進(jìn)行了大膽的改進(jìn),在一個(gè)40cm*40cm*12cm的有機(jī)玻璃敞箱中央安裝一個(gè)10cm*10cm*12cm的暗箱,因而構(gòu)成另兩對(duì)角的“L”形跑道(明箱),每一個(gè)暗箱各有一個(gè)3.5cm*3.5cm的洞口與兩側(cè)的跑道相連。裝置上方裝有電視掃描和攝像系統(tǒng),由此觀察小鼠的穿箱次數(shù)、在明箱滯留時(shí)間及運(yùn)動(dòng)活性。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
1)有抗焦慮的均可以增加動(dòng)物的穿箱次數(shù)以及在明箱的滯留時(shí)間,非抗焦慮劑則無(wú)此作用。
2)在此模型上抗焦慮劑相對(duì)使用強(qiáng)度與臨床試驗(yàn)結(jié)果一致。
3)Shimada改良明暗箱實(shí)驗(yàn)敏感性好,無(wú)論是經(jīng)典的抗焦慮劑或者致焦慮劑,還是丁螺環(huán)酮等新型抗焦慮劑,在此模型上都呈陽(yáng)性結(jié)果。
【條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
環(huán)境刺激與作為條件性強(qiáng)化的某種藥物搭配,使動(dòng)物在環(huán)境刺激與藥物之間建立聯(lián)系,形成操作性行為,從而可以觀察動(dòng)物對(duì)搭配環(huán)境的偏愛(ài)程度來(lái)測(cè)定搭配藥物的強(qiáng)化效應(yīng)。條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)可以與各種具有依賴(lài)性的藥物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)(Conditioned Place Preference, CPP)實(shí)驗(yàn)是目前評(píng)價(jià)藥物精神依賴(lài)性的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)?zāi)P停彩菑V泛應(yīng)用于尋找抗覓藥行為的有效工具。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
該實(shí)驗(yàn)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)置于條件性位置偏愛(ài)箱的白色觀察區(qū),并給予精神依賴(lài)性藥物(例如嗎啡),然后觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在條件性位置偏愛(ài)箱的黑色區(qū)和白色區(qū)的活動(dòng)情況,白色區(qū) 、黑色區(qū)以及其中的灰色區(qū)之間有小門(mén)可供動(dòng)物自由穿梭。動(dòng)物每次處于給藥區(qū)就會(huì)在藥物獎(jiǎng)賞性效應(yīng)的作用下對(duì)黑色和白色區(qū)域產(chǎn)生位置上的偏好,其程度與藥物的精神依賴(lài)性相關(guān)。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動(dòng)物必須對(duì)實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒(méi)有恐懼感。
②如果動(dòng)物掉落在地,最好將此動(dòng)物剔除。?
③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。
【社會(huì)交互行為測(cè)試】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
動(dòng)物交際實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)設(shè)計(jì)是在小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測(cè)小鼠靠近位于實(shí)驗(yàn)箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時(shí)間,來(lái)判斷小鼠的社交能力。在實(shí)驗(yàn)中,通常會(huì)比較小鼠靠近關(guān)有熟悉小鼠的金屬籠時(shí)間與陌生小鼠金屬籠的時(shí)間,來(lái)判斷動(dòng)物的社交能力。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
社會(huì)交互行為測(cè)試(3-Chambered Social Test)是最常用的用于評(píng)估自閉癥行為的實(shí)驗(yàn)。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
在小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測(cè)小鼠靠近位于實(shí)驗(yàn)箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時(shí)間,來(lái)判斷小鼠的社交能力。在實(shí)驗(yàn)中,通常會(huì)比較小鼠靠近關(guān)有熟悉小鼠的金屬籠時(shí)間與陌生小鼠金屬籠的時(shí)間,來(lái)判斷動(dòng)物的社交能力。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動(dòng)物必須對(duì)實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒(méi)有恐懼感。
②如果動(dòng)物掉落在地,最好將此動(dòng)物剔除。?
③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。
【孔板實(shí)驗(yàn)】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
該實(shí)驗(yàn)是利用新奇(curiosity)和恐懼(fear)兩個(gè)因素來(lái)控制動(dòng)物在新環(huán)境下的行為,用逃避(escapes) 來(lái)反映這兩個(gè)因素的作用結(jié)果。動(dòng)物反復(fù)鉆頭(head一dipping)反映其新奇感和對(duì)逃避的渴望。一般認(rèn)為,藥物在不影響動(dòng)物運(yùn)動(dòng)活性的劑量下,增加鉆頭次數(shù)和時(shí)間,表現(xiàn)為抗焦慮作用,減少鉆頭次數(shù)和時(shí)間則為致焦慮作用。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
孔板實(shí)驗(yàn)被廣泛用于藥效研究。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
大鼠和小鼠的實(shí)驗(yàn)裝置有所不同。大鼠裝置為一個(gè)66cm x 56cm x 47cm的木箱,底板有4個(gè)直徑為3 . 8cm、深1 cm的等大圓孔,其中兩孔離最近壁14cm,另兩孔17cm,孔板水平抬高12em;小鼠木箱為44cm x 40cm x 27cm , 4個(gè)孔的孔徑均為3cm,厚1. 8cm,每孔中心離最近壁的距離為l0cm。 80年代之后,孔板箱壁及每一孔周邊都裝有紅外光電管,并與微機(jī)相聯(lián),這樣可同時(shí)自動(dòng)記錄動(dòng)物的鉆頭次數(shù)和鉆頭時(shí)間、運(yùn)動(dòng)活性及站立數(shù)等多項(xiàng)指標(biāo),既提高了工作效率,又增加了實(shí)驗(yàn)的可靠性。實(shí)驗(yàn)用雄性成年的大鼠或小鼠。將動(dòng)物置于孔板中央,背朝觀察者。動(dòng)物兩眼消失在洞中為一次鉆頭(a head一dip),記錄5-10min的鉆頭次數(shù)及鉆頭持續(xù)時(shí)間。
(4)案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①對(duì)孔板箱的形狀和大小沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),但常采用方型,其邊長(zhǎng)在大鼠一般60cm,小鼠為40c m左右。
②孔的數(shù)量早期多為16孔,現(xiàn)在通常采用4孔板。
③動(dòng)物在上午的鉆頭數(shù)往往比下午多。因此,應(yīng)盡量在每天固定的時(shí)間內(nèi)做實(shí)驗(yàn)。
④本實(shí)驗(yàn)對(duì)致焦慮藥(如BDZ受體反相激動(dòng)劑)引起探究性鉆頭的特異性降低結(jié)果較為一致,而某些缺乏抗焦慮作用的藥物(如BDZ受體拮抗劑氟馬西尼)反可使探究性鉆頭增加。故在篩選未知藥物時(shí)應(yīng)結(jié)合其它焦慮模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。
【高價(jià)十字迷宮】
(1) 實(shí)驗(yàn)原理
高架十字迷宮(High plus maze)是利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸敞開(kāi)臂的恐懼形成矛盾沖突行為來(lái)考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。
高架十字迷宮具有一對(duì)開(kāi)臂和一對(duì)閉臂,嚙齒類(lèi)動(dòng)物由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng),但出于好奇心和探究性又會(huì)在開(kāi)臂中活動(dòng),在面對(duì)新奇刺激時(shí),動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生探究的沖動(dòng)與恐懼,這就造成了探究與回避的沖突行為,從而產(chǎn)生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進(jìn)入開(kāi)臂的次數(shù)與時(shí)間,十字迷宮距離地面較高,相當(dāng)于人站在峭壁上,使實(shí)驗(yàn)對(duì)象產(chǎn)生恐懼和不安心理。
(2) 應(yīng)用簡(jiǎn)介
高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于新藥開(kāi)發(fā)、篩選、評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)-研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,是開(kāi)展行為學(xué)研究尤其是焦慮抑郁研究的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。
(3) 實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)將小鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮,記錄5分鐘內(nèi)的活動(dòng)情況。觀察指標(biāo)包括:開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)(必須有兩只前瓜進(jìn)入臂內(nèi)),開(kāi)放臂停留時(shí)間,閉合臂進(jìn)入次數(shù),閉合臂停留時(shí)間。計(jì)算開(kāi)放臂停留時(shí)間比例,開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)比例,高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。實(shí)驗(yàn)完成后將小鼠取出,將兩臂清理干凈,噴灑酒精除去氣味,最后用Xeye動(dòng)物行為學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
(4) 案例展示
(5) 常見(jiàn)問(wèn)題
①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動(dòng)物必須對(duì)實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒(méi)有恐懼感。
②如果動(dòng)物掉落在地,最好將此動(dòng)物剔除。?
③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。
【服務(wù)流程】